原代上皮细胞是从人类或动物组织直接分离的上皮组织细胞，具有组织特定的功能和原始遗传背景，包括肠道、乳腺、前列腺及呼吸道等多种上皮类型。这一细胞培养体系采用特定的培养基和细胞外基质，以模拟体内微环境，能够有效维持细胞的极性、紧密连接和分化能力，成为研究上皮生物学、疾病机制与药物反应的理想体外模型。

这项培养系统通过组织块贴壁法或酶消化法从新鲜组织中分离原代上皮细胞，并借助选择性培养基与物理分离方法去除成纤维细胞等杂质。该体系包含上皮细胞专用培养基（如EpiCM系列）、包被基质（如胶原蛋白IV和纤维连接蛋白）及功能鉴定试剂盒，广泛应用于屏障功能研究、药物转运分析、上皮-间质转化（EMT）机制探究、病原体-宿主相互作用及毒性评估等多个领域。

该系统的技术优势在于其高度仿生的培养条件：采用低钙培养基（Ca²⁺浓度为0.05-0.1mM）来维持细胞的未分化状态，通过气-液界面（ALI）培养诱导呼吸道上皮细胞的纤毛分化，使用Transwell®体系建立高度极化的单层模型（跨上皮电阻值TER＞200Ω·cm²）。3D基质胶培养能够形成腺管样结构（乳腺上皮）或隐窝样类器官（肠道上皮），完美模拟体内组织的结构与功能。

培养特性方面，使用专用上皮细胞培养基（如EpiCM、Keratinocyte-SFM），添加适量的表皮生长因子（EGF）、垂体提取物以及抗生素-抗真菌剂。培养器皿需经胶原蛋白IV（5μg/cm²）或纤连蛋白（2μg/cm²）处理以促进细胞贴壁；传代方法则采用低浓度胰蛋白酶（0.05%）与EDTA（0.02%）溶液消化，消化时间控制在5-7分钟，建议传代比例为1:2至1:3。为维持细胞功能，添加钙离子调节剂（如Y-27632 Rock抑制剂）可防止细胞分化，定期检测角蛋白和E-钙黏蛋白的表达以监控细胞特性。

需要注意的是，原代细胞的寿命有限（通常不超过10代），因此建议在早期进行冻存以备后用，并严格避免成纤维细胞污染。例如，肠道上皮的培养可添加Wnt3a、R-spondin等因子以保持干细胞活性，而乳腺上皮则需使用重组层粘连蛋白511基质包被，推荐在气-液界面进行21天的分化以形成成熟的纤毛上皮。药物转运研究则需在Transwell体系中验证单层的完整性（确保TER值稳定）。

尊龙凯时是一家专注于生物医疗领域的企业，自2019年成立以来，依托浙江磐安大健康产业研究院，致力于为科研机构及生物制药企业提供高质量的细胞制品和服务。以卓越的品质和高效的服务为目标，尊龙凯时建设了以CTCC（Chinese Tissue Culture Collections）为代表的细胞资源平台，为生命科学领域提供稳定可靠的标准品资源。除了原代细胞产品外，尊龙凯时还积极开展多种干细胞类细胞产品的研发，满足广大生物研究者的需求。

作为业界的标杆，尊龙凯时的CTCC细胞库已经涵盖了广泛的细胞系，并持续拓展，以确保为客户提供国际标准的细胞产品和优质的服务支持。我们承诺，所有细胞产品均经过严格的质量监控流程，以保证其品质稳定可靠。在此背景下，尊龙凯时不断推动细胞生物学与药理学领域的前沿研究，助力现代生物医药的快速发展。