本试剂盒仅限于科学研究使用，不可用于医学诊断。该试剂盒采用双抗体一步夹心法进行酶联免疫吸附试验（ELISA）。在预先包被了adropin（AD）抗体的微孔板中，先添加样本和标准品，然后加入HRP标记的检测抗体。经过温育和彻底洗涤后，使用TMB底物显色，TMB在过氧化物酶的催化下转变为蓝色，随后在酸性条件下变为最终的黄色。颜色的深浅与样品中adropin（AD）的浓度成正相关。通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。

试剂盒组成

本试剂盒提供以下配置：

• 微孔酶标板：96孔配置（12孔×8条）和48孔配置（12孔×4条）
• 标准品：无
• 样本稀释液：6mL（96孔配置）、3mL（48孔配置）
• 检测抗体-HRP：10mL（96孔配置）、5mL（48孔配置）
• 20×洗涤缓冲液：25mL（96孔配置）、15mL（48孔配置）
• 底物A：6mL（96孔配置）、3mL（48孔配置）
• 底物B：6mL（96孔配置）、3mL（48孔配置）
• 终止液：6mL（96孔配置）、3mL（48孔配置）
• 封板膜：2张
• 说明书：1份
• 自封袋：1个

注：标准品浓度依次为：0、25、50、100、200、400 pg/mL。

试剂盒保存和有效期

请将试剂盒保存在2-8℃的条件下，产品有效期为6个月。

样品收集与处理

为保证结果的准确性，请遵循以下方法处理样品：

1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，避免任何细胞刺激，收集后以3000转离心10分钟分离血清与红细胞。
2. 血浆：采用EDTA、柠檬酸盐或肝素进行抗凝，3000转离心30分钟获取上清。
3. 细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织用生理盐水捣碎，3000转离心10分钟获取上清。
5. 保存：不及时检测的样本应分装并冻存于-20℃，避免反复冻融，解冻时确保样品充分均匀。

自备物品

为进行实验，本试剂盒需配备以下设备：

• 酶标仪（450 nm）
• 高精度加样器及枪头（05-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL）

操作步骤及注意事项

1. 试剂盒从冷藏取出后，应在室温下平衡15-30分钟后使用，未用完的板条需密封保存。
2. 稀释洗涤液时，可适当加热帮助溶解。
3. 每一步加样均需使用加样器，并定期校对其准确性，优选在5分钟内完成加样，如样本数量较多，推荐使用排枪加样。
4. 进行每次测定时，请同时制作标准曲线，并做重复孔；如样本OD值过高，请使用样本稀释液稀释。
5. 封板膜为一次性使用，避免交叉污染。
6. 实验操作必须遵循说明书，结果判定以酶标仪读数为准。
7. 底物需避光保存。
8. 所有样品、洗涤液及废弃物应按照感染处理。
9. 不同批次的组分不得混用。

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