尊龙凯时的产品是基于探针法荧光定量PCR原理开发的高效检测试剂盒，具备以下特点：

产品特点

1. 即开即用：用户仅需提供样品DNA模板，即可进行实验。

2. 高灵敏度：经优化的引物及其它组分确保产品具备较高的灵敏度。

3. 附带阳性对照：便于区分假阴性样本，提高检测的准确性。

4. 优异特异性：根据中间普雷沃菌的DNA序列高保守区设计引物，有效避免与其他生物样本DNA的交叉反应。

5. 定性与定量兼容：适用于定性与定量检测，定量检测时线性范围至少达5个数量级。

6. 足够量：可支持50次20μL体系的探针法荧光定量PCR反应。

7. 仅限科研使用。

使用方法

一、DNA提取（样本制备区）

用户可自行选择方法提取纯化样品DNA，本试剂盒与市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。

二、稀释标准曲线样品（样本制备区）

注意：因阳性对照浓度较高，稀释操作需在独立区域进行，以防污染。

1. 标记六个离心管，分别命名为7, 6, 5, 4, 3, 2。

2. 向每个管中加入45μL DEPC-H2O（建议使用带芯枪头）。

3. 在7号管中加入5μL浓度为1×10⁸拷贝/μL的阳性对照，震荡1分钟，得到1×10⁷拷贝/μL的标准曲线样品，放冰待用。

4. 换枪头，将6号管中加入5μL浓度为1×10⁷拷贝/μL的阳性对照，震荡1分钟，得到1×10⁶拷贝/μL的标准曲线样品，放冰待用。

5. 继续此步骤直至得到6个不同稀释度的标准曲线样品，放冰待用。若无需制作标准曲线，可将阳性对照稀释至1×10⁵拷贝/μL。

三、试剂配制（试剂准备区）

根据待检样品数量N，准备N+2个qPCR管（N个待检样品+1个阴性对照+6个阳性对照），向每个PCR管中加入相应成分（详细说明请索取）。

四、添加模板（模板添加区）

向qPCR管中分别加入2μL模板，添加顺序为阴性对照（DEPC-H2O）、待测样品模板、婴儿利什曼虫qPCR阳性对照，离心30秒后立即进行扩增反应。

五、扩增反应（扩增及产物分析区）

将PCR管放置在PCR扩增仪器的相应位置，进行扩增，扩增程序请参考详细说明。

六、结果分析

1. 如制作标准曲线，则以阳性对照浓度的log值为横轴，以Ct值为纵轴绘制标准曲线，从中推算待测样品的DNA浓度。

2. 若未制作标准曲线，根据以下标准判定结果：阳性对照Ct值<30且有明显指数增长，形成典型的S型曲线；阴性对照显示Ct值38或无Ct值，无指数增长；样本检测若Ct值<35且有显著增长，则为阳性；Ct值在35-38之间，应复检，若仍有增长则判定为阳性，反之为阴性。

运输及保存

本产品应低温运输，保存温度为-20℃，保存期限为一年。阳性对照须单独存放，以免污染其他试剂。

选择尊龙凯时，为您的科研工作提供可靠的支持。