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LNP递送mRNA,尊龙凯时助力转染更轻松!

发布时间:2025-03-26   信息来源:尊龙凯时官方编辑

尊龙凯时提供了一项重要的生物技术解决方案,针对裸露 RNA 的挑战。由于 RNA 带有负电荷,亲水性大分子特性使其难以通过细胞膜,且容易被 RNA 酶迅速降解,因此需要有保护性的外壳以安全进入细胞内。细胞膜主要由脂质构成,利用脂质囊泡能够有效封装 RNA,帮助 RNA 穿过细胞膜并释放到细胞质中。确保囊泡带有正电荷是关键,这样才能与带负电的 RNA 结合,避免细胞毒性反应。

LNP递送mRNA,尊龙凯时助力转染更轻松!

脂质纳米粒(LNP)作为 RNA 传递系统的机制包括多个步骤,确保 mRNA 的有效递送和蛋白质表达。在 LNP 中,可电离的阳离子脂质是核心组成部分,能在自组装期间负载结带负电的 RNA,并在中性 pH 条件下保持不带电状态以减少细胞毒性,而后在细胞吸收后适时带正电以促进内体逃逸。胆固醇和 PEG 修饰的脂质变体也展现出调节 LNP 物理特性和最终效能的能力。两性离子磷脂通常被称为“辅助脂质”,在 LNP 的结构稳定性和功能中发挥关键作用,确保 mRNA 可以被有效保护、传递并激活免疫反应。

在进行 LNP 转染实验时,以下步骤适用于 6 孔板的单孔参考条件。对于其他的培养形式,可以参考相关指南表。

1. mRNA 预混液的制备:将 25 μg mRNA(浓度为 1 μg/μL)与 60 μL Buffer 混合。

2. mRNA-easyLNP 复合物的制备:将 625 μL mRNA 预混液与 625 μL easyLNP 纳米混悬液混合,涡旋 2-3 秒以保证均匀。

3. 加入细胞:将 125 μL mRNA-easyLNP 复合物加入细胞中,轻轻晃动以实现均匀分散。

4. 分析时间:在培养 24-48 小时后进行分析。

根据 mRNA 转染需要的细胞培养容器,以下是各类型孔板的转染指南:

  • 96 孔板:每孔使用 40 ng/μL 的 mRNA 预混液。
  • 24 孔板:每孔使用 12 μL 的 mRNA 预混液。
  • 6 孔板:每孔使用 60 μL 的 mRNA 预混液。

产品推荐方面,尊龙凯时提供一系列转染试剂,如 mRNA 转染试剂、easyLNP™ 转染试剂盒以及其它相关的核酸转染试剂,满足不同实验需求。同时,尊龙凯时还提供各种实验室辅助产品,助力科研人员在生物医疗领域取得更大的突破。